Прошлые записи

Бактериальные суспензии

Бактериальные суспензииБактериальные суспензии доводятся с помощью оптического стандарта до плотности, эквивалентной 1,0 mg/ml, и разводятся 1:50; в результате на миллилитр приходится от 2х105до 106 бактерий. Сам инокулят, получаемый при помощи петли, должен содержать от 5×103 до 104 бактерий на одну пробирку. Культуры, содержащие препараты, и две контрольных пробирки без препаратов инкубируются при 37°С в течение 4 недель, либо в течение 5-6 недель, если рост во время первого считывания недостаточен. Результаты фиксируются следующим образом: ++++ при сливном росте, +++ и ++ при большом числе отдельных колоний, + при наличии 50-100 колоний и при наличии 20-49 колоний. Ингибирование роста фиксируется, если число колоний составляет менее 20 при росте от ++++ до +++ в контрольных пробирках без препарата.

Центры по контролю за заболеваниями рекомендуют проводить исследование на агаре 7Н10 с концентрациями препаратов, приведенными в Табл. 1. Критическая доля бактерий, при которой штамм считается устойчивым, равна 1% для всех препаратов, исследуемых методом пропорций на агаре. Агарная среда 7Н10 или 7Н11 обычно готовится из имеющейся в продаже агарной основы Миддлбрука 7Н10. Порошок суспендируют в дистиллированной воде в стерильных флаконах, автоклавируют при 12ГС в течение 10 минут и охлаждают до 52-54°С на водяной бане. Обогащение олиевой кислотой, альбумином, декстрозой и каталазой добавляется асептически в количестве 10% от объема охлажденного раствора агара. Каждый флакон со средой используется для приготовления либо одного контроля без препаратов, либо содержащей препарат среды. Соответствующие рабочие растворы препаратов, приготовленные из кратного количества исходного раствора, добавляются для достижения конечных концентраций, приведенных в таблице. Содержимое каждого флакона распределяется в одном из квадрантов в наборе стерильных разделенных на четыре части чашек, примерно по 5,0 ml на квадрант, один квадрант со средой без препарата и три — со средой, содержащей препарат. Для исследования с четырьмя препаратами первого ряда требуются две чашки Петри, а для 10 препаратов — четыре чашки Петри. После инкубации в темноте при 37°С на протяжении ночи чашки Петри с препаратами хранятся в темноте в холодильнике, и использовать их надо в течение 4 недель после приготовления.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Популярное

Copyright © 2015. All Rights Reserved.