Прошлые записи

Множество исследований

Множество исследованийМножество исследований показали, что изониазид ингибирует синтез миколевых кислот у М. Tuberculosis . Отсюда неудивительно, что с помощью генетического отбора у быстрорастущего вида-модели, Mycobacterium smegmatis, удалось выявить белок, участвующий в синтезе миколевых кислот, который придает устойчивость к изониазиду при мутации или повышенной экспрессии. Этот белок, InhA, является редуктазой белка — переносчика еноил-ацильного радикала, которая в качестве кофактора использует НАД. Около 20% изониазид-устойчивых клинических изолятов М. Tuberculosis содержат мутации гена inhA, и почти все они происходят в области промотора, по всей видимости увеличивая его экспрессию. Реже изониазид — устойчивые мутации приводят к заменам аминокислот, которые снижают аффинитет белка InhA к кофактору НАД-Н. Рентгеновские кристаллографические исследования с изониазидом показали, что карман InhA для связывания НАД-Н был занят комплексом НАД+/изониазид, чей аффинитет к InhA был в 200 раз выше, чем у НАД-Н. Таким образом, этот комплекс является очень эффективным ингибитором.

В то время как фермент InhA безусловно является мишенью для изониазида у быстрорастущей М. Smegmatis , его значение для устойчивости к изониазиду у М. Tuberculosis подвергается сомнению. Если InhA работает как редуктаза белка-переносчика ацильных радикалов, ингибирование InhA приведет к накоплению ненасыщенных жирных кислот. Однако в случаях, когда М. Tuberculosis подвергается воздействию изониазида, накапливаются насыщенные жирные кислоты. Было высказано мнение, что другая мишень для изониазида у М. Tuberculosis, KasA, больше соответствует биохимическим данным. KasA — кетоацил-БПА — синтаза, которая была выделена в ковалентном комплексе с изони — азидом и еще одним белком, АсрМ. АсрМ — белок-переносчик ацильных радикалов со специфичностью к длинноцепочечным жирным кислотам, предшественникам миколевых кислот. В присутствии изониазида на АсрМ накапливались насыщенные предшественники С26, а количество как белка KasA, так и АсрМ увеличилось, отражая некий механизм ап-регуляции. Одно исследование обнаружило мутации kasA в 4 из 28 изониазид — устойчивых клинических изолятов, подтверждая его роль как мишени для изониазида, однако другие исследования выявили некоторые из этих мутаций у изониазид-чувствительных штаммов. Кроме того, так как, по всей видимости, ни KasA, ни АсрМ не связывают НАД-Н или НАД ингибирование комплексом изониазид/НАД+ представляется маловероятным. Возможно, однако, что другие токсические промежуточные соединения изониазида являются токсичными для белков-мишеней без соединения с НАД.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Популярное

Copyright © 2015. All Rights Reserved.